红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题: (1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步:_______、_______、_______和______。 (2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。 ①.加入柠檬酸钠的目的是_____________________。 ②.在样品处理中包括红细胞的洗涤、___________________、分离血红蛋白溶液、透析。 ③.洗涤红细胞的目的是____________,你如何知道红细胞已洗涤干净?___________。 ④.分离红细胞时对离心速度和离心时间的要求是_________________。 ⑤.若离心速度过高和时间过长结果会怎样?_____________________。 (3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析,这就是样品的粗分离。 ①.透析的目的是_____________________________。 ②.透析的原理是_____________________________。 (4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 ①.样品纯化的目的是__________________。 ②.血红蛋白有什么特点?____________________。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义?____________________。 |